张启发表示,稻谷是世界许多地区的主要食物来源,除淀粉外,稻米还含丰富多样的营养物质,包括蛋白质、维生素、膳食纤维、类黄酮等次生代谢物、不饱和脂肪酸油、矿物质等。
7、傅里叶(FTIR-8400S)红外测定取适量的KBr并用玛瑙研钵研磨,取极少量干燥后的KGM粉末,与KBr研磨均匀,放置压片器压片,将压好的样品薄片置于配有ATR附件的傅里叶红外光谱仪上测试,扫描波数范围为650~4000cm-1,分辨率为4cm-1,扫描后得到KGM红外光谱图﹔通过相同的操作方法获得了最佳制备条件下的EKGM红外光谱图,并与KGM的红外光谱进行比较。EKGM磷含量的测定,称取0.5g试样放入50mL的锥形瓶中,加入15mL(3:1,v/vH2S04和HN03混合液)硝化到液体清亮。
6、Box-Behnken实验设计在单因素实验基础上,确定Box-Behnken设计的自变量,并以EKGM的DS为响应值,通过响应面分析对改性条件进行优化。葡甘露聚糖(KGM)是一种具有典型假塑性的高分子杂多糖,有良好的增稠性、凝胶性、成膜性、生物降解性、保健性和药理作用,可应用于食品和生物医学领域,然而KGM水溶胶稳定性比较差,使它的应用受到很大的限制。在上述固定条件下得知,SHMP:KGM的质量比为1:7时取代度最大。3、酯化魔芋葡甘露聚糖(EKGM)的制备称取一定比例的SHMP和KGM,加适量水溶解SHMP,用盐酸调到特定pH值,在磁力搅拌的过程中迅速再加入称好的KGM混合均匀,在超声中将反应充分加热一段时间,反应结束后将生成物冷却至室温,加入40%乙醇洗涤,清洗数遍直到检测不出磷时结束,过滤放置在表面上,电热鼓风干燥箱设置80℃,进行干燥,最后可得到酯化好的EKGM。产物总磷含量GB/T12092-1989《淀粉及其衍生物磷总含量测定方法》方法进行测定,产物中结合磷、游离磷测定都是根据分光光度法测定磷含量的标准曲线的方法进行显色测得的,取代度的计算公式:式中:Mr=162,表示淀粉分子的每个葡萄糖相对分子质量为162。
二、结果与分析1、单因素结果分析(1)SHMP与KGM的比例对DS的影响按SHMP:KGM质量比为1:6,1:7.1:8,1:9,1:10称取SHMP和KGM,用60ml水溶解SHMP,用盐酸调至pH=3,在机械搅拌条件下加入KGM,待混合均匀后在超声55℃下反应1.5h后冷却、反应后用40%的乙醇搅拌清洗样品直至检测不出磷结束,过滤,干燥,得到不同程度的EKGM进行测定、分析,见图2。5、单因素实验分别控制单因素变量SHMP:KGM的比例,溶液pH,超声反应温度以及超声反应时间,以EKGM的取代度为指标,控制其他三个因素的值不变,来考察某一个因素的变化对取代度的影响。一、材料与方法1、材料与仪器硝酸(默克级):德国Merck公司。
电子天平:瑞士Mettler-Toledo仪器(上海)有限公司。(2)提取剂选择实验方法准确称取海苔粉0.1000g于50mL离心管中,平行3份,依次向3根离心管中加入超纯水20mL,摇匀后于90C水浴锅中提取2h。地壳中主要以氧化物和铝硅酸盐等稳定形态存在。二、结果与分析1、海苔中本底铝的分布未经研磨的海苔样品消解后得到海苔总铝含量,这些铝均为海苔在生长过程中吸收并存在于海苔细胞中,因此海苔中的总铝就是本底铝。
以这些高铝生物为原材料生产的食品中也会存在含量较高的铝,本文将上述食品原材料带入到食品中的铝统称为食品本底铝。而Rengel等对巨型海藻细胞的研究表明,99.99%的铝存在于海藻细胞壁中。
人体摄入铝的主要途径是食品,食品中铝除了由食品原材料带入的本底铝外,还有一部分来自食品加工中使用的含铝食品添加剂。由表2可知,海苔细胞壁中的铝含量占比为93.7%,而细胞器组分和细胞可溶性组分的铝含量之和占比6.3%,表明海苔中的铝高度富集于细胞壁中。乙二胺四乙酸二钠、氢氧化钾、硝酸、草酸、蔗糖(分析纯):国药集团化学试剂有限公司。而含铝食品添加剂产生的离子态铝,主要存在形式是Al3+、AIOH2+、Al(OH)2+,易于被人体吸收产生慢性毒性,离子态铝才是对人体产生毒性的根源。
GB2760-2014规定豆类制品、面糊、裹粉、煎炸粉、油炸面制品、虾味片、焙烤食品及腌制水产品(仅限海蛰)等食品中出于工艺需要可以使用硫酸铝钾/铵作为食品膨松剂或稳定剂,但铝的残留量(干样品,以AI计)须符合相应限量要求。(4)电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)条件仪器条件如表1所示。因此铝在生物体内是普遍存在的,只是含量不同,食品中藻类、茶叶等较高,蔬菜、水果等较低。Centrifuge离心机:德国eppendorf中国有限公司,350X电感耦合等离子体质谱仪:PerkinElmer公司。
分别用提取剂氢氧化钾溶液(0.04mol/L)硝酸溶液(2%)、乙二胺四乙酸二钠溶液(300mg/L)、草酸溶液(900mg/L)代替超纯水重复上述过程。超纯水器:英国ELGA有限公司。
取出冷却后以8000r/min转速离心10min,移取上清液过0.45um针式滤膜,移取2mL滤液于10mL刻度容量瓶中,用2%HNO3定容至10mL,摇匀后上ICP-MS测定。研磨30min至海苔细胞完全破碎后,转移至50mL离心管中,300g下离心5min,沉淀部分为细胞壁组分,取上清液于8500g下离心30min,沉淀为细胞器组分,上清液为细胞可溶性组分。
目前测定食品中铝的国标方法是GB5009.1822017《食品安全国家标准食品中铝的测定》,利用强酸在高温或高压下破坏食品的有机成分,使食品中铝全部转化为离子态存在于溶液中进行测定,因而此法测定的是食品中总铝含量。铝是地壳中含量最丰富的金属元素,但不是人体的必需元素,它不参与人体正常生理代谢,长期过量摄入铝会产生慢性毒性如神经系统和骨骼损害等。声明:本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》,版权归原作者所有。水浴锅:德国memmert有限公司。2、方法(1)差速离心法分离海苔细胞各组分准确称取海苔样品0.25g(精确至0.0001g)于玛瑙研钵中,平行3份,加入含有蔗糖(85g/L)和二硫赤鲜醇(150mg/L)的混合溶液为研磨介质。随着气候变化、人类活动和工业发展等,稳定形态的铝逐步转化为离子态铝,导致土壤和水体中铝浓度升高。
Chang等研究了烟叶中的铝,认为烟叶中87%~89%的铝分布于烟叶细胞壁中,并且与细胞壁中的果胶和半纤维素紧密结合,结合位点很可能是细胞壁多糖中的大量羧基。但是食品总铝超.标并不一定就是生产企业违规使用了含铝食品添加剂,可能是由食品原料带入的本底铝高引起,而现行检测方法无法区分食品本底铝与食品添加剂残留铝,极易造成误判、错判。
JianLY等研究了水稻根尖细胞的抗铝毒反应,揭示生长在高铝环境中的水稻根尖通过将铝转运至细胞壁果胶中来提高铝毒抗性,而果胶甲酯化是水稻根尖细胞抵抗铝毒的重要手段。(3)提取条件优化单因素实验方法以EDTA浓度(30mg/L、60mg/L、150mg/L、300mg/L、450mg/L、600mg/L)、提取时间(5min、10min、20min、30min、40min、60min)提取温度(25℃、70℃、80℃、90℃、95℃)、振摇频次(0次、1次、2次、3次、5次)等为影响因素,以添加剂残留铝提取率为指标进行单因素实验。
本方法利用离子态铝极易被EDTA络合的特性,采用乙二胺四乙酸二钠溶液提取食品中的添加剂残留铝,提取液酸化后用电感耦合等离子体质谱仪测定海苔是一种生长在海水中的互生藻类,而海水中富含铝离子,因此海苔细胞璧中的铝极可能是海苔在生长过程中抗铝毒反应的产物。
JianLY等研究了水稻根尖细胞的抗铝毒反应,揭示生长在高铝环境中的水稻根尖通过将铝转运至细胞壁果胶中来提高铝毒抗性,而果胶甲酯化是水稻根尖细胞抵抗铝毒的重要手段。存在于土壤和水体中的铝离子极易被某些植物和藻类吸收,贮存在细胞组织结构中,与有机成分结合组成细胞壁,Zdenko等发现珊瑚藻细胞壁中的铝占总铝含量的9.99%,Yang等的研究表明细胞壁中的铝主要与果胶结合。食品添加剂专家委员会认为,含铝食品添加剂的使用是人群铝暴露风险的主要来源,因此GB2760-2014对含铝食品添加剂在食品中的使用范围和使用量有明确规定。分别用提取剂氢氧化钾溶液(0.04mol/L)硝酸溶液(2%)、乙二胺四乙酸二钠溶液(300mg/L)、草酸溶液(900mg/L)代替超纯水重复上述过程。
离心管:江苏康捷医疗器械有限公司。Chang等研究了烟叶中的铝,认为烟叶中87%~89%的铝分布于烟叶细胞壁中,并且与细胞壁中的果胶和半纤维素紧密结合,结合位点很可能是细胞壁多糖中的大量羧基。
本方法利用离子态铝极易被EDTA络合的特性,采用乙二胺四乙酸二钠溶液提取食品中的添加剂残留铝,提取液酸化后用电感耦合等离子体质谱仪测定。由表2可知,海苔细胞壁中的铝含量占比为93.7%,而细胞器组分和细胞可溶性组分的铝含量之和占比6.3%,表明海苔中的铝高度富集于细胞壁中。
乙二胺四乙酸二钠、氢氧化钾、硝酸、草酸、蔗糖(分析纯):国药集团化学试剂有限公司。Centrifuge离心机:德国eppendorf中国有限公司,350X电感耦合等离子体质谱仪:PerkinElmer公司。
(3)提取条件优化单因素实验方法以EDTA浓度(30mg/L、60mg/L、150mg/L、300mg/L、450mg/L、600mg/L)、提取时间(5min、10min、20min、30min、40min、60min)提取温度(25℃、70℃、80℃、90℃、95℃)、振摇频次(0次、1次、2次、3次、5次)等为影响因素,以添加剂残留铝提取率为指标进行单因素实验。随着气候变化、人类活动和工业发展等,稳定形态的铝逐步转化为离子态铝,导致土壤和水体中铝浓度升高。而Rengel等对巨型海藻细胞的研究表明,99.99%的铝存在于海藻细胞壁中。电子天平:瑞士Mettler-Toledo仪器(上海)有限公司。
以这些高铝生物为原材料生产的食品中也会存在含量较高的铝,本文将上述食品原材料带入到食品中的铝统称为食品本底铝。因此铝在生物体内是普遍存在的,只是含量不同,食品中藻类、茶叶等较高,蔬菜、水果等较低。
但是食品总铝超.标并不一定就是生产企业违规使用了含铝食品添加剂,可能是由食品原料带入的本底铝高引起,而现行检测方法无法区分食品本底铝与食品添加剂残留铝,极易造成误判、错判。硫酸铝钾/铵与食品发生反应后,以Al3+、AlOH2+、Al(OH)2+态存在,本文将含铝食品添加剂带入的铝统称为食品添加剂残留铝。
一、材料与方法1、材料与仪器硝酸(默克级):德国Merck公司。GB2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中允许使用的含铝食品添加剂有硫酸铝钾、硫酸铝铵、含铝铝色淀等,其中含铝色素允许使用量很低,对食品中铝的贡献可以忽略不计,故食品中添加剂残留铝主要来源于硫酸铝钾、硫酸铝铵。